PCR yoki polimeraza zanjirli reaktsiyasi - bu ma'lum bir DNK bo'lagining millionlab nusxalari bajariladigan laboratoriya protsedurasi. Aslida, bu kuchaytirish usuli bo'lib, unda qon, soch yoki to'qimalarda mavjud bo'lgan DNKning eng kichik miqdori tahlil uchun etarli hajmda ko'chirilishi mumkin.


Ushbu texnikaning nomi DNK polimeraza deb nomlangan DNK replikatsiyasini bajaradigan asosiy komponentdan olingan. Bu ferment tabiatda mavjud. Eng ko'p ishlatiladigan polimeraza - Thermus aquaticus bakteriyasidan olingan Taq polimeraza. Bu ferment 70 daraja Selsiy atrofida optimal darajada ishlaydi. U asl DNKdan shablon va DNK oligonukleotidlari (shuningdek, primer deb ham ataladi) yordamida yangi DNK zanjirini yaratishi mumkin. PCRda ishlatiladigan primerlar sintezlangan, DNKning qisqa uchlari, ular nusxa ko'chirish uchun DNK hududining uchlariga to'g'ri keladi.


PCR bakteriyalar tomonidan ishlatilgan oldingi DNK replikatsiya usullarini almashtiradi va bu bir necha hafta davom etadi. Shuningdek, PCR yuqori tezlikda - bir necha soat davomida o'tkazilishi mumkin. Tezlik tezligi diagnostika rejimida tez natijalar zarur bo'lganda talab qilinadi. PCR 1983 yilda ixtirosi uchun kimyo bo'yicha Nobel mukofotiga sazovor bo'lgan Kari Mullis tomonidan ishlab chiqilgan. O'shandan beri PCR diagnostika va tadqiqot vositasi sifatida keng qo'llanilmoqda. Uning qo'llanilishi molekulyar biologiya, mikrobiologiya, genetika, klinik diagnostika, sud tibbiyoti, ekologiya, merosni o'rganish va otalikni tekshirish kabi ko'plab ilmiy fanlar bo'yicha juda katta va keng tarqaldi.


PCR dasturi


Yuqumli agentlarni aniqlash


PCR OIV, gepatit, inson papillomavirusi (genital siğil va bachadon bo'yni saratoni qo'zg'atuvchisi), Epstein-Barr virusi (bezli isitma), bezgak va kuydirgi kabi yuqumli kasalliklarning klinik namunalarini tahlil qilishda keng qo'llaniladi.


PCR, ayniqsa, OIVni erta aniqlashda bebahodir, chunki u infektsiyadan bir necha hafta yoki oy o'tgach ishlab chiqariladigan antikorlardan farqli o'laroq, inson hujayralarida virus DNKini aniqlay oladi. Bundan tashqari, PCR yordamida virus yukini aniqlash mumkin (ya'ni, tanada qancha virus aylanib yuradi).


An'anaviy tarzda bezgak kasalligi mikroskopik qon tekshiruvi yordamida bezgak parazitlarini (Plasmodium falcipurum) aniqlash orqali aniqlanadi. Biroq, PCR texnologiyasi foydali, chunki u bezgakning turlarini tezda aniqlay oladi. Bu aralash infektsiya holatlarida, shuningdek, dori bilan davolash turini aniqlashda muhim ahamiyatga ega. Hozirgi vaqtda PCR mikroskopik tekshiruvni to'ldirish uchun ishlatiladi.


PCR yordamida kuydirgi qo'zg'atuvchisi Bacillus anthracis bakteriyasini aniqlash mumkin. Ushbu infektsiyalarni tezda tashxislash zarurati tufayli, PCR klinik namunalarda kuydirgi borligini aniqlashda muhim vositaga aylandi. U kamida 24 soat davom etadigan laboratoriyada bakteriyalar etishtirish uchun namunadan foydalanishning an'anaviy usullarini almashtiradi. PCR tezkor, sezgir va o'ziga xos alternativani taqdim etadi.


PCRning saraton kasalligini aniqlashdagi o'rni


PCR - bu bebaho vosita, chunki u bemorning prognozi haqida ma'lumot beradi va terapiyaga javob yoki qarshilikni bashorat qiladi. Ko'pgina saraton kasalliklari ma'lum genlarning kichik mutatsiyalari bilan ajralib turadi va bu PCRni aniqlash uchun ishlatiladi.


Masalan, o'tkir miyeloid leykemiyada (AML) t (8:21) deb nomlanuvchi mutatsiyaning mavjudligi yaxshi prognozni ko'rsatishi mumkin, chunki ma'lumki, bu mutatsiyani tashuvchi bemorlarda ba'zi dorilar muvaffaqiyatli bo'ladi. Flt3 deb nomlangan genda mutatsiyaning mavjudligi, kemoterapi bilan davolanishga to'liq javob bermaydigan va davolanishdan keyin qayt qilish xavfi yuqori bo'lgan bemorlarni aniqlashi mumkin.


PCR, shuningdek, leykemiya bilan og'rigan bemorlarni davolanishdan so'ng, ularning tanasida hali ham aylanib yurayotgan saraton hujayralari sonini hisoblash orqali ham kuzatilishi mumkin.